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色譜柱的使用和維護(hù)

色譜柱的使用和維護(hù)  卡套柱是默克公司推出的新型環(huán)保色譜柱技術(shù)，它具有以下的特點(diǎn)：
· 換柱方便：不需要任何工具，僅用雙手手指即可以輕松換柱
· 防止?jié)B漏：避免了柱頭頻繁拆卸而造成的滲漏
· 經(jīng)濟(jì)實(shí)惠：每次只需要購(gòu)買柱芯，可以節(jié)約40~60%的費(fèi)用
· 適用性強(qiáng)：可以和任何品牌的液相色譜儀器連接使用 
每天用足夠的時(shí)間來(lái)平衡色譜柱，您就會(huì)在處理問(wèn)題方面獲得最大的"補(bǔ)償"，
而且您的色譜柱的壽命也會(huì)變得更長(zhǎng)！-------------一定得做！ 
新的色譜柱在使用之前應(yīng)該在您自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測(cè)試，即使用色譜柱附帶的檢驗(yàn)報(bào)告上的測(cè)試條件和樣品來(lái)測(cè)定該色譜柱的柱效。并且，在以后的使用中，應(yīng)時(shí)常對(duì)色譜柱進(jìn)行測(cè)試。
卡套柱的安裝(不加預(yù)柱)

1. 將卡套架1套入柱芯2
2. 將兩片夾套片3嵌入柱芯的凹槽，使柱芯高于夾套
3. 將已套到柱芯上的卡套架1向上推，直至高過(guò)夾套片
4. 將卡套帽4和卡套架旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊
5. 然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
6. 連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手
注意；使用卡套柱時(shí)，兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗，任何時(shí)候都不能將卡套取下來(lái)，否則會(huì)造成填料的流失。
卡套柱的安裝(加預(yù)柱)

1. 將卡套架1套入柱芯2
2. 將兩片夾套片3嵌入柱芯的凹槽，使夾套高于 柱芯2
3. 將已套到柱芯上的卡套架1向上推，直至高過(guò)夾套片
4. 將"子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)
5. 將卡套帽4和卡套架1旋在一起，然后用手?jǐn)Q緊
6. 然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
7. 連接到液相色譜儀，PEEK接頭手?jǐn)Q即可；若為不銹鋼接頭應(yīng)使用專用扳手

平衡色譜柱
反相色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)干掉，因此在用流動(dòng)相分析樣品之前，應(yīng)使用10~20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱；如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"。
· 硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動(dòng)相，請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡
如何平衡色譜柱？
· 在拿到一根新的色譜柱時(shí)，應(yīng)首先用0.2ml/min的流速將色譜柱平衡過(guò)夜，然后將流速升高到1.0ml/min沖洗30分鐘，以便將色譜柱的填料充分平衡至最佳狀態(tài)，這樣可以保證色譜柱的使用壽命，并且保證在以后的使用中，獲得分析結(jié)果的重現(xiàn)性。
· 平衡過(guò)程中，將流速緩慢地提高
· 用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低，則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡)
色譜柱的再生
色譜柱在使用一段時(shí)間后柱效會(huì)下降，這時(shí)可以考慮對(duì)色譜柱進(jìn)行再生。
進(jìn)行色譜柱再生時(shí)，應(yīng)使用一個(gè)廉價(jià)的泵，我們建議：最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
表1 建議用來(lái)沖洗的溶劑體積
色譜柱尺寸柱體積所用溶劑的體積
125-41.6ml30ml
250-43.2ml60ml
250-1020ml400ml

請(qǐng)根據(jù)下表選擇您的再生方法：
極性固定相(如Si, NH2*, DIOL基色譜填料)的再生：
正庚烷 e 氯仿 e乙酸乙酯 e 丙酮 e乙醇e 水**
非極性固定相(如反相色譜填料RP-18,RP-8, CN等)的再生： 
水 e乙腈 e 氯仿(或異丙醇) e 乙腈 e 水
0.05M稀硫酸可以用來(lái)清洗已污染的色譜柱
注意：
*在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí)，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。
**如果簡(jiǎn)單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，用0.05M的硫酸沖洗非常有效。
色譜柱的維護(hù)：
1. 使用預(yù)柱保護(hù)分析柱（硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度）
2. 大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2~7.5，盡量不超過(guò)該色譜柱的pH范圍
3. 避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化
4. 流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理
5. 如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢將柱子沖洗干凈，并保存在乙腈中
6. 壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號(hào)