來(lái)源:中國(guó)機(jī)械設(shè)備網(wǎng) 時(shí)間:2019-02-21 瀏覽量:45 次
保健食品中蘆薈甙的測(cè)定(高效液相色譜法)
1.范圍
本方法規(guī)定了蘆薈膠囊、蘆薈片劑、蘆薈汁等保健食品種蘆薈甙含量的測(cè)定方法。
本方法適用于蘆薈膠囊、蘆薈片劑、蘆薈汁等保健食品中蘆薈甙的測(cè)定。
本方法的最低檢出量10mg。
本方法的最佳線性范圍:0~100μg/mL y=1124194x+3215:線性關(guān)系r=0.9999
2.原理
用甲醇+水(55+45)作為溶劑,提取試樣中的蘆薈甙,經(jīng)高效液相色譜儀C18柱分離,紫外檢測(cè)器293nm條件下檢測(cè),以蘆薈甙保留時(shí)間定性,峰面積定量。
3.試劑
(1)甲醇:色譜純。
(2)水:重蒸水。
(3)蘆薈甙標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥98%。
(4)蘆薈甙標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:準(zhǔn)確稱取蘆薈甙標(biāo)準(zhǔn)品10mg,加流動(dòng)相甲醇+水(55+45)溶解并移入100mL容量瓶中,定容至刻度。
4.儀器設(shè)備
(1)501液相色譜儀(UV501紫外檢測(cè)器),7725I手動(dòng)進(jìn)樣閥,DT-230A色譜柱溫箱,N2000色譜工作站
(2)色譜柱 C18(以十八烷基鍵合硅膠填料為填充劑)或具同等性能的色譜柱,150mm×6mm,5μm。
(3)超聲波清洗器。
(4)C18凈化富集柱 C18預(yù)柱子裝量0.5g,分配型。
(5)離心機(jī)3000r/min。
5.色譜分離條件
(1)流動(dòng)相:甲醇+水55+45。
(2)流速:1mL/min。
(3)柱溫:40℃。
(4)檢測(cè)波長(zhǎng): 293nm。
(5)靈敏度:0.016AUFS。
(6)進(jìn)樣量:10μL。
6.分析步驟
(1)試樣制備
將固體試樣粉碎成粉末狀,混勻。準(zhǔn)確稱取上述經(jīng)處理后的試樣1.00g于50mL容量瓶中,加檢測(cè)用流動(dòng)相30mL溶解,經(jīng)超聲振提5min加流動(dòng)相定容50mL,離心沉淀,上清液經(jīng)濾膜(0.45μm)過(guò)濾,蘆薈汁飲料直接經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾。
(2)測(cè)定步驟
分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液10μL注入高效液相色譜儀,依上述色譜條件,以保留時(shí)間定性,用外標(biāo)法計(jì)算試樣中蘆薈甙的含量。
7.計(jì)算公式
A1×C×V
X= —————
A2×m
式中:
X—試樣中蘆薈甙含量mg/g(mg/ mL);
A1—試樣中蘆薈的峰面積;
C—標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,mg/ mL;
A2—標(biāo)準(zhǔn)液中蘆薈甙的峰面積;
V—試樣定容體積,mL;
m—試樣質(zhì)量,g(mL)
8.允許誤差
同一試樣兩次測(cè)定值之差不得超過(guò)兩次測(cè)定平均值的10%。