精品一2卡三卡乱码免费,国产手机在线国内精品,成人区人妻精品一区二区,被夫の上司持久侵犯日本

反相高效液相色譜緩沖體系PH的選定

   反相高效液相色譜中緩沖體系PH值的選擇在反相高效液相色譜分析中，選擇正確的緩沖液PH值，對可離解的化合物分析的重現(xiàn)性十分重要，不恰當(dāng)?shù)腜H值可能導(dǎo)致不對稱峰，寬峰，分裂峰或肩峰，而尖銳的，對稱的峰是定量分析中獲得低的檢測限以，兩次分析之間較低的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）和保留時間的高重現(xiàn)性的前提。我們將討論在使用緩沖液時如何選擇緩沖液的PH值，以及如何選擇正確的緩沖體系。

什么時候需要緩沖溶液？
   在反相液相色譜分析中，流動相的PH值一般在2.5－7之間，當(dāng)被分析物在反相條件下可離解，或樣品的PH值在2.5－7之外時，就需要緩沖液。在反相條件下可離解的化合物一般都有氨基和羧基，他們的Pka在1－11之間，選擇正確的緩沖液PH值可保證可離解的官能團(tuán)以一種形式存在，離子形式或中性化合物的形式。如果樣品的PH值對柱子有傷害，則緩沖溶液可使其變溫和從而減小其危害。

如何選擇緩沖液PH值
   在選擇緩沖液PH值之前，應(yīng)先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka兩個PH值單位的，有助于獲得好的、尖銳的峰，從HH公式：PH＝Pka＋log（[A-]/[A]）得知，溶液PH值高于或低于Pka兩個單位，化合物中99％以一種形式存在，而一種形式存在的化合物才能獲得好的尖銳的峰。

   當(dāng)化合物只有氨基時，緩沖體系的選擇十分簡單，大多數(shù)氨基化合物在PH值小于9時都被質(zhì)子化，所以所有PH值在7或更低的溶液均適合應(yīng)用，你也許會問水的PH值大約是7，為什么還用緩沖鹽，因為緩沖鹽有助于增加方法的可*性，以及色譜峰的尖銳性，PH值的降低有助于氨基化合物保留的減弱，減小化合物與硅膠表面硅羥基的作用，而使峰更尖銳，從表1 可值，任何緩沖液均可應(yīng)用于氨基化合物的分析，但我們認(rèn)為PH值等于3的磷酸鉀鹽最適合用于氨基化合物的分析。
   在上面兩個例子中，PH＝3的磷酸鉀鹽都能獲得良好的應(yīng)用，在一般情況下，它是含羧基和氨基化合物分析中最好的緩沖液，并且我們認(rèn)為在氨基化合物分析中鉀鹽比鈉鹽更好。

為離子對試劑選擇緩沖液
   為應(yīng)用離子對試劑的方法選擇緩沖液的過程是相似的，離子對試劑例如四丁基銨的鹽，十四烷基磺酸鈉等，在流動相中可與化合物中可離解的官能團(tuán)配對，在緩沖液中以離子形式存在的化合物就需要應(yīng)用離子對試劑。

應(yīng)用緩沖液PH值來調(diào)節(jié)方法選擇性
   如前面提到的，氨基化合物的保留隨PH的減小而降低，這個特性可以用來調(diào)節(jié)方法的選擇性，如果兩個化合物共流出，一個含有氨基，適當(dāng)改變PH值就可以用來分離這一物質(zhì)對。由于可離解化合物的選擇性依*PH值，所以變化PH值也可以用來鑒別未知化合物的官能團(tuán)，如果PH值變小，出峰便快，則化合物中可能存在氨基，當(dāng)PH變大,化合物出峰很快，或流出在死時間處，化合物可能是一種羧酸，因為羧基離子化后流出大大快于比質(zhì)子化的中性化合物。

總結(jié)
    正確選擇緩沖溶液在反相液相色譜方法中對于優(yōu)化尖峰，撿出限，以及獲得穩(wěn)定的保留時間十分重要，如果你知道化合物官能團(tuán)信息和化合物的Pka值這一過程將十分簡單。